Question

2) Si la secuencia de la cadena de ADN es CGT-AAT, la complementariedad de la
cadena de ARN será:​

Answer 1

Respuesta:

El ARN es el ácido nucleico más abundante en la célula. Lo sintetiza la enzima ARN

polimerasa a partir de una molécula de ADN mediante un proceso denominado

transcripción. La ARN polimerasa sintetiza el ARN en dirección 5'→3', de modo que

la hebra de ADN que actúa como molde está orientada en sentido 3'→5', por lo que

también se la conoce como hebra sin sentido (antisense), hebra no codificante

(noncoding) o hebra (─)

Explicación:

La hebra de ADN complementaria a la que actúa como molde presenta la misma

secuencia que el transcrito de ARN (aunque, lógicamente, contiene T en lugar de U) y

se la conoce como hebra con sentido (sense), hebra codificante (coding) o hebra (+).

Los genes pueden estar en cualquiera de las dos hebras del ADN, así que una misma

hebra será codificante en algunos casos y no codificante en otros. A veces se pueden

encontrar regiones del ADN donde cada hebra codifica un gen distinto. Estas regiones

de solapamiento (coloreadas en la figura inferior) son problemáticas porque suelen

confundir a los programas que buscan genes de forma automática.

Cuando se va a depositar la secuencia de un gen en una base de datos, se

envía siempre la secuencia de la hebra codificante. .- Secuenciación química del ARN

En 1965 se secuenció el primer ARN: el Ala-RNAt, formado por 77 nucleótidos. Se

utilizaron métodos similares a los que se emplearon en el caso de las proteínas:

hidrólisis parcial mediante enzimas, fraccionamiento de los productos en una columna

de intercambio iónico y análisis químico. Las enzimas utilizadas fueron la ribonucleasa

pancreática, que rompe el ARN tras una base pirimidínica (C y U) y la ribonucleasa T1,

que escinde la molécula de ARN después de una G o una I (inosina).

Poco después, Fred Sanger desarrolló un método basado en la hidrólisis enzimática y la

posterior separación y análisis de los oligonucleótidos generados (marcados con 32P)

mediante cromatografía bidimensional en papel. De este modo, en 1968, consiguió

secuenciar el ARNr de 5S, que tiene una longitud de 120 nucleótidos.

Este tipo de secuenciación del ARN puede complicarse debido a la presencia de

nucleótidos atípicos o modificados en el ARNt y en el ARNr. Hoy en día, la presencia

de nucleótidos modificados se puede detectar con relativa facilidad gracias a la

espectrometría de masas.

2.- Secuenciación del ARN a partir del ADNc (EST, RNA-Seq)

Si el ARN carece de nucleótidos atípicos o modificados, su secuencia se puede

determinar directamente a partir de la secuencia de ADN genómico (ADNg) que lo

codifica. En eucariotas, sin embargo, es muy habitual que la secuencia de las

moléculas de ARNm que van a ser traducidas no coincida exactamente con la secuencia

del ADN genómico, ya que los transcritos primarios de ARN pueden experimentar

diversas modificaciones mediante los procesos de maduración del ARN (RNA

splicing) o edición del ARN (RNA editing). Durante la maduración del ARN se

eliminan los intrones del transcrito primario y se empalman los exones para generar un

ARNm maduro. La edición del ARN es un proceso en el que se pueden añadir, eliminar

o sustituir nucleótidos en la secuencia del ARN. En estos casos, la secuencia del ARNm

se puede obtener directamente a partir del ADN complementario (ADNc), que es una

molécula de ADN sintetizada por la enzima transcriptasa inversa a partir de una

molécula de ARNm que actúa como molde. Obviamente, la secuencia del ADNc no

coincidirá con la del ADNg.

Generación de ADNc a partir de moléculas de ARNm

En primer lugar, se extrae todo el ARN celular y se hace pasar a través de una columna

de celulosa unida a cadenas de oligo(dT). Las colas de poli(A) de las moléculas de

ARNm quedan retenidas en la columna, mientras que el resto del ARN la atraviesa. A

continuación se utiliza un tampón de elución que rompe los puentes de hidrógeno entre

la cola de poli(A) y las cadenas de oligo(dT) y permite extraer el ARNm de la columna.

Este ARNm servirá de molde para que la transcriptasa inversa sintetice una hebra de

ADNc utilizando como cebadores oligo(dT), que hibridan con la cola de poli(A). La

transcriptasa inversa genera una molécula híbrida ADN/ARN. Esta molécula se trata

brevemente con una ribonucleasa que digiere parcialmente la hebra de ARN (algunas

transcriptasas inversas tienen actividad ribonucleasa H que, durante el proceso de